Jueves 12 de noviembre del 2009

PCR

Polymerase Chain Reaction (ingles)

Reacción en Cadena de la Polimerasa (español)

Este es un aparato que se utiliza en biología molecular para multiplicar pedazos de ADN muchas veces en un tiempo corto.

Además contamos con otros aparatos en los laboratorios, como ya se había mencionado en el primer parcial encontramos al Secuenciador, el cual permite ver las bases nitrogenadas que se encuentran en cierto ADN, de forma ordenada.

Para copiar un pedazo de ADN se necesita básicamente:

1. Tener el ADN o gen que se desea copiar.

2. Enzima. Generalmente se utiliza la Polimerasa TAQ (Termofilus Aquaticos), pero hay muchas mas.

3. Nucleótidos

4. Primers (cebadores).

Para saber:

Los Primers son pequeñas secuencias de ADN que reconocen uno de los extremos de los genes que se desean copiar. Generalmente se utilizan DOS uno para cada extremo de la cadena helicoidal.

Sin los primers la polimerasa no podría pegarse al ADN impidiendo que se hagan replicas de este.

Ciclos que lleva a cabo el PCR:

Estos tienen el propósito de amplificar la muestra de ADN que se quiere replicar.

Los ciclos se basan en 4 pasos:

1. Iniciación
2. Desnaturalización
3. Alineamiento
4. Elongación

Y para finalizar los ciclos tenemos el paso llamado Terminación.

Primer proceso o acción:

El primer paso a realizar es mezclar todos los materiales básicos ( gen, enzima, nucleótidos y primers), en tubos muy pequeños.

Paso	Temperatura	Tiempo	Proceso
Iniciación	94°C	9 minutos	En este se calienta la muestra, para prepararla para iniciar con los pasos siguientes. En este paso ningún material actúa, están intactos.
Desnaturalización	98°C	30 segundos	Surge la separación de ADN por el rompimiento de los puentes de hidrógeno debido a las altas temperaturas. En este las enzimas al igual que los primers siguen intactos solo actúa el ADN
Alineamiento	50°C a 54°C	40 segundos	La temperatura se baja lo suficiente APRA que los primers actúen pero sin dejar que el ADN se vuelva a juntar. Los primers se pegan al ADN uno en cada extremo de las cadenas ya separadas.
Elongación	72°C	5 minutos(varia según enzimas a utilizar)	A esta temperatura la TAQ Polimerasa actúa haciendo copia del gen inicial
Terminación	30°C	1 minuto	Se baja la temperatura para que las cadenas helicoidales se unan.

Para saber mas:

Los ciclos pueden ser muchos o pocos estos varían dependiendo de cuantas copias se quieren tener. Pero lo normal es que sean 30 ciclos, lo cual toma desde 1 a 2 horas.

El PCR: Este dispositivo al reproducir un gen se basa sobre un crecimiento exponencial.

Diferencia entre la Trascripción y el PCR:

Trascripción	PCR
Este es un proceso que ocurre de forma natural, el propio cuerpo lo crea.	Este es un proceso que es controlado por una persona.

Al momento de graficar el proceso de un PCR, se vería una variación de bajas y altas, por los cambios de temperatura.

Marialejandra Robles

Jueves 5 de noviembre del 2009

“Biotecnología e Ingeniería Genética”

¿Qué es biotecnología?

Es la utilización de seres vivos para mejorar el uso de la tecnología.

¿Qué es ingeniería genética?

Es la modificación de genes con el fin de mejorar la vida.

Insulina: Antes de 1968 la insulina era tomada del páncreas del cerdo, por lo que esto era difícil, y se corría el riesgo de alergias en las personas, así que se creo un nuevo procedimiento que consiste en:

1. Crear un plásmido, cuya función fuera crear insulina con el gen humano.

2. Insertarlo en una bacteria por medio de electroshoks, para que la membrana de esta vibrara y se abriera y así cayera dentro un plásmido.

3. La bacteria lo pasaría a otras bacterias y así ellas desecharían la insulina por que es algo que ellas no ocupan. Y así se obtienen litros y litros de insulina.

Terapia génica:

Es una terapia que cura enfermedades que ya vienen en los genes, esta tienen que ser enfermedades que afecten a un solo gen, un ejemplo clásico es el de la Anemia Falciforme.

Esta se usa de la siguiente manera:

1. Toman un virus.

2. Le quitan el ADN y le dejan la cápside, esto de una manera secreta y patentada.

3. Agarran el gen faltante y lo insertan dentro de la cápside.

4. Infectan a la persona, por lo que el virus ataca y distribuye el gen.

Daniela Gomez Ojeda

Miercoles 4 de noviembre del 2009

Los ácidos nucleicos son un tipo de biomoléculas que generan y forman la vida, estos están compuestos principalmente de Carbono, entre las cuales encontramos:

• Lípidos
• Carbohidratos
• Proteínas
• Ácidos Nucleicos

Los ácidos nucleicos se dividen en dos tipos:

- ADN (ácido desoxirribonucleico)

- ARN (ácido ribonucleico)

(Estos son polimeros hechos de monomeros los cuales son nucleotidos).

Los nucleótidos son:

• Fosfato
• Azúcar
• Base Nitrogenada

El azúcar puede ser desoxirribosa la cual corresponde al ADN o pude ser ribosa la que le corresponde al ARN

Las bases nitrogenadas son:

• Adenina
• Timina
• Citosina
• Guanina

Estructura de una célula PROCARIOTA y EUCARIOTA

Procariota	Eucariota
PRIMITIVA (NO contiene núcleo)	MODERNA (contiene núcleo)
El ADN se encuentra en el CITOPLASMA	El ADN se encuentra en el NÚCLEO
El ADN contiene 1 SOLO cromosoma de forma CIRCULAR	El ADN contiene 23 PARES distintos de cromosomas acomodados en forma LINEAL
NO cuenta con Nitrones	SI cuenta con NITRONES
La zona donde se encuentra su ADN se denomina NUCLEOIDE	El ADN esta asociado a HISTONAS que forman las proteínas en grupos de 8
Contiene un PLASMIDO el cual da características especiales a las bacterias como Resistencia a antibióticos	Las proteínas de esta célula forman una estructura llamada NUCLEOSOMAS
El ADN NO se encuentra protegido	El ADN se encuentra protegido
SI contiene POLI-A	NO contiene POLI-A

Hablemos de los plasmidos:

Los plasmidos son una parte que se puede encontrar en algunas bacterias (procariotas), el cual les da como un plus a estas como un ejemplo encontramos la resistencia a antibióticos. Esta parte de estas células ha sido de gran ayuda e investigación para la Ingeniería Genética.

Como se produce un GEN:

Estos se crean cuando en las células eucariotas encontramos una sección de ADN queprodujo o produce una proteína completa. En nuestro cuerpo nuestros genes están hechos en un45% de proteínas repetidas.

El ADN de las células eucariotas cuenta con 300 pares de bases iguales o bien de secuencias repetidas.

El ADN de las células ecuriotas cuentan con dos secciones:

1. Exones: Estos SI se codifican al momento de la traducción y conforman del 1 al 3% del ADN.
2. Intrones: Estos NO se codifican al momento de hacer la traducción.

Procesos de TRANSCRIPCION y TRADUCCION:

Trascripción: En este hay un cambio de ADN por ARN, el cual ocurre en los dos tipos de células (procariotas, eucariotas). Este se divide en tres pasos los cuales son:

• Iniciación
• Elongación
• Finalización

Y en las células EUCARIOTAS existe un paso mas llamado MADURACION.

1. Iniciación:

Al gen promotor del ADN (el cual se encuentra antes del gen que se va a copiar), se pega al ARN polimerasa.

2. Elongación:

En este paso se separan las cadenas helicoidales, formando la cadena complementaria uniendo nucleótidos siempre de 5´a 3´y de 3´a 5´.

Cuando se han formado de 30 a 40 nucleótidos, se forma una capucha, la cual tendrá como función proteger al ARN y posteriormente en el proceso de trascripción dejar entrar las ribosomas.

3. Finalización:

En este paso un codon detiene la producción de juntar nucleótidos donde el ARN de polimerasa se separa del ADN separando las 2 cadenas formadas y al ARNmensajerso se le pega una Poli-A, la cual esta formada por 200 adeninas juntas, esto ultimo solo ocurre en el caso de las celulas PROCARIOTAS.

MADURACION: Este proceso solamente sucede en las células eucariotas, donde se eliminan los Intrones pues estos no se pueden codificar, lo cual deja a los Exones juntos.

Tipos de ARN

1. Ribosomal (ARNr) con una abundancia del 80 al 90%.
2. Transferencia (ARNt) con una abundancia del 5 al 7%.
3. Mensajero (ARNm) con una abundancia del 3 al 5%.

El ARN RIBOSOMAL es el que se encarga de formar las ribosomas en una estructura de una unidad pequeña y otra grande como un 8

El ARN TRANSFERENCIA es el que se encarga de formar los aminoácidos.

El ARN MENSAJERO es el que sale del núcleo por medio de las ribosomas.

El ARNm en los dos tipos de células.

Marialejandra Robles

Procariota	Eucariota
Una misma secuencia de este ARN puede producir muchas proteínas por la presencia de la POLI-A	Una misma secuencia de este ARN solo produce pocas proteínas por la presencia de un SOLO GEN.